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Comment trouvez-vous la concentration d'ADN à partir de l'absorbance?
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Vidéo: Comment trouvez-vous la concentration d'ADN à partir de l'absorbance?

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Vidéo: Comment utiliser une courbe d'étalonnage ? 2024, Novembre
Anonim

Concentration d'ADN est estimée en mesurant la absorbance à 260 nm, en ajustant le A260 mesure de la turbidité (mesurée par absorbance à 320 nm), en multipliant par le facteur de dilution et en utilisant la relation qu'un A260 de 1,0 = 50 ug/ml d'ADNdb pur.

De même, les gens demandent, comment trouvez-vous la concentration d'ADN ?

Pour déterminer la concentration d'ADN dans l'échantillon d'origine, effectuez le calcul suivant:

  1. Concentration d'ADNdb = 50 g/mL × DO260 × facteur de dilution.
  2. Concentration d'ADNdb = 50 g/mL × 0,65 × 50.
  3. Concentration d'ADNdb = 1,63 mg/mL.

Aussi, qu'est-ce qu'une bonne concentration d'ADN ? UNE bon qualité ADN l'échantillon doit avoir un A260/UNE280 ratio de 1,7-2,0 et un A260/UNE230 rapport supérieur à 1,5, mais étant donné que la sensibilité des différentes techniques à ces contaminants varie, ces valeurs ne doivent être prises qu'à titre indicatif pour la pureté de votre échantillon.

De cette façon, l'ADN absorbe-t-il à 280 nm ?

Le rapport d'absorbance à 260 nm vs 280 nm est couramment utilisé pour évaluer ADN contamination des solutions protéiques, car les protéines (en particulier les acides aminés aromatiques) absorber lumière à 280 nm.

Comment utilisez-vous NanoDrop pour la concentration d'ADN ?

Fondamentalement le nanogoutte vous donne la possibilité de sélectionner ADN , ARN, protéines. Vous devez sélectionner ADN , puis placez 2 L d'eau (mili Q de préférence) sélectionnez "Vierge" après cela, placez 2 L d'eau supplémentaires pour confirmer que la mesure est à 0. Placez ensuite 2 ΜL de votre échantillon. Vous obtiendrez la mesure.

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