Vidéo: Existe-t-il d'autres méthodes pour purifier les produits PCR ?
2024 Auteur: Miles Stephen | [email protected]. Dernière modifié: 2023-12-15 23:36
Pour les applications qui nécessitent PCR nettoyage ou validation de PCR résultats, là sont deux méthodes généralement suivi: Produit PCR isolement à l'aide d'une colonne et gel purification à partir d'un gel d'agarose.
Ici, quel type de chromatographie est utilisé pour purifier les produits PCR ?
Pour purifier les produits PCR, une chromatographie d'exclusion stérique est utilisée. Cela piège les petites molécules telles que les protéines, amorces , et les nucléotides tandis que les grosses molécules comme les produits PCR sont trop grosses pour entrer dans les billes et passer à travers la colonne dans les tubes de collecte.
Et comment purifier l'ADN ? En gros, vous pouvez purifier ton ADN échantillons en lysant vos échantillons cellulaires et/ou tissulaires selon la procédure la plus appropriée (rupture mécanique, traitement chimique ou digestion enzymatique), en isolant les acides nucléiques de ses contaminants et en les précipitant dans une solution tampon adaptée.
De plus, pourquoi purifions-nous le produit PCR ?
Purification d'ADN d'un PCR La réaction est généralement nécessaire pour une utilisation en aval et facilite l'élimination des enzymes, des nucléotides, des amorces et des composants du tampon. Les méthodes couramment utilisées emploient des colonnes de centrifugation contenant une matrice de silice à laquelle l'ADN peut être lié sélectivement en présence de sels chaotropiques.
Pourquoi l'ADN doit-il être nettoyé ?
Nous nettoyer en haut ADN à partir de solutions aqueuses pour éliminer les sels tampons, les enzymes ou d'autres substances qui pourraient affecter les applications en aval. Les exemples incluent la réaction PCR nettoyer en haut, nettoyer après les digestions de restriction et nettoyer up de génomique ou plasmidique ADN contaminés par des protéines/débris cellulaires.
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