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Vidéo: Comment charger un échantillon en chromatographie sur colonne ?
2024 Auteur: Miles Stephen | [email protected]. Dernière modifié: 2023-12-15 23:36
Pour charger la colonne:
- Dissoudre le échantillon dans la quantité minimale de solvant (5 à 10 gouttes).
- À l'aide d'une pipette ou d'une seringue à aiguille épaisse, égouttez le échantillon directement sur le dessus de la silice.
- Une fois l'ensemble échantillon a été ajouté, autorisez le colonne égoutter pour que le niveau de solvant touche le sommet de la silice.
A ce propos, combien de silice utilisez-vous dans une colonne ?
Une bonne plage est de 100/20 à 100/10 (5 à 10 mL) d'éluant pour 100g silice . Ce n'est pas une bonne idée de utilisation un solvant différent ici - la séparation sera gravement compromise.
Deuxièmement, comment fonctionne la chromatographie flash sur colonne ? Chromatographie éclair . Fine couche chromatographie est utilisé pour surveiller les réactions, vérifier la pureté des composés et optimiser les mélanges de solvants pour chromatographie sur colonne . C'est une micro-technique qui nécessite de très petites quantités de composé.
De ce fait, pourquoi est-il important de ne pas laisser sécher la phase stationnaire lors du fonctionnement d'une colonne ?
En d'autres termes, le lisier à l'intérieur du colonne ne devrait jamais être autorisé à déssecher . Si cela se produit, cela peut créer des fissures et des irrégularités dans le solide phase , ce qui diminuera l'efficacité de la séparation. L'échantillon à séparer est chargé en solution dans un solvant approprié, de préférence le plus concentré possible.
Que se passe-t-il si la colonne s'assèche ?
Si tu laisses le colonne à sec la silice commencera à se fissurer et vous obtiendrez une mauvaise séparation de vos composés. Comme toi Cours les colonne , ne laissez jamais le niveau de solvant descendre en dessous du niveau du gel de silice ou vous obtiendrez de mauvais résultats.
Conseillé:
Qu'est-ce que la colonne par rapport à la chromatographie sur couche mince?
La chromatographie sur colonne est un autre type de chromatographie liquide. Cela fonctionne exactement comme TLC. La même phase stationnaire et la même phase mobile peuvent être utilisées. Au lieu d'étaler une fine couche de la phase stationnaire sur une plaque, le solide est emballé dans une longue colonne de verre sous forme de poudre ou de suspension
Quelle est la différence et la similitude entre la chromatographie sur colonne et la CCM ?
La principale « différence entre » ces deux est que la « chromatographie en couche mince » utilise une phase stationnaire différente de la chromatographie sur colonne. Une autre différence est que la 'chromatographie en couche mince' peut être utilisée pour distinguer des mélanges non volatils, ce qui n'est pas possible en Chromatographie sur colonne.'
En quoi la chromatographie sur couche mince est-elle différente de la chromatographie sur papier ?
La différence fondamentale entre la chromatographie sur couche mince (CCM) et la chromatographie sur papier (PC) est que, alors que la phase stationnaire du PC est du papier, la phase stationnaire de la CCM est une fine couche d'une substance inerte supportée sur une surface plane et non réactive
Comment emballer les colonnes pour la chromatographie sur colonne ?
Emballage d'une colonne (gel de silice): Utilisez un morceau de fil pour ajouter un tampon de coton au bas de la colonne. Fixez la colonne à un support annulaire et ajoutez suffisamment de sable pour remplir la partie incurvée de la colonne. Placer une pince à pince sur le tube, puis remplir la colonne 1/4 à 1/3 avec l'éluant initial
Comment le gel de silice est-il préparé pour la chromatographie sur colonne ?
Préparation de la colonne : préparer une suspension de gel de silice avec un solvant approprié et verser doucement dans la colonne. Ouvrez le robinet d'arrêt et laissez un peu de solvant s'écouler. La couche de solvant doit toujours recouvrir l'adsorbant; sinon des fissures se développeront dans la colonne